三隅 倫 巨乳 CCK-8检测细胞增殖/毒性的旨趣、方法及留隐痛项

Cell Counting Kit-8（简称CCK-8）是一种基于WST-8的平时应用于细胞增殖和细胞毒性的检测试剂。WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2，4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，是一种类似于MTT的化合物，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）存在的情况下，被线粒体中的脱氢酶归附为具有高度水溶性的橙黄色甲瓒产品（formazan）。细胞增殖越多越快，颜料越深；细胞毒性越大，则颜料越浅三隅 倫 巨乳，关于相通的细胞，颜料的浅深与活细胞的数目成正比，因此可愚弄这一特质平直进行细胞增殖和毒性分析。

图1. CCK-8检测旨趣图

CCK-8的优点

产生的甲瓒产品是水溶性的，无需换液，适合悬浮细胞

不需要发射性同位素和有机溶剂，对细胞的毒性小

CCK-8细胞活性检测试剂毋需预制，即开即用

贤达度高，线性限度宽，数据可靠，重现性好

操作便捷，省时省力

适合于高通量药物筛选

CCK-8的污点：

与MTT法比较，CCK-8的价钱比较贵

CCK-8试剂的颜料为淡红色，与含酚红的培养基颜料接近，操作经过中容易漏加或多加

本质一：细胞增殖分析

1）制备细胞悬液，计数。 2）在96孔板中接种细胞悬液，每孔约100μl，相通的样本可作念3个访佛。 3）将培养板放入培养箱中预培养一段时间（37℃， 5%CO2），细胞贴壁需要简略2-4h，若是是悬浮细胞，该设施不错省去。 4）每孔各加入10μl CCK-8溶液，由于加入的CCK-8量比较少，可能会因试剂沾在孔壁上而带来间隙，提议在加完试剂后轻轻荡漾培养板以匡助混匀，或者平直设置含10

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